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離心機的选择
浏覽次數:1637發布日期:2019-08-09

I 離心機的相关知识介绍                                                       

離心技術主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液在高速旋轉下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細胞器、生物大分子的沈澱等)以一定的速度沈降,從而與溶液得以分離,而沈降速度取決于顆粒的質量、大小和密度。

●     相對離心力(RCF)

 

又稱爲(g)力是在離心過程中實際施加在樣品上的作用力。

RCF=1.18x離心半徑(mm)x(轉速/1000)2

   在離心過程中能夠直接設定離心力離心,可以使結果更加准確、可靠,更具有科學性。

●     轉速(rpm)

通常以每分鍾多少轉來表示。相對離心力與轉子轉速的平方成正比。因此,轉速是決定離心力的主要因素。

●     離心半徑

指转子中轴到样品管中心的距离,離心半徑与离心力成正比。不同的转子具有不同的離心半徑。不同厂家相同容量的離心機转子半径不同,相同的转速所得到的离心力也不同,

對RCF會産生很大影響。

 

 

综上所述:转速、離心半徑均对离心力产生较大影响,在实际使用过程中,能够直接设定离心力,就可以把影响降到zui小。

 

 

 

II 離心效果                                                                    

 

●     離心積分

相对离心力和离心时间是决定离心效果的关键因素。但无法仅用这两个参数来准确衡量离心效果。上公认使用離心積分(HRF)来衡量离心效果。

      離心積分是指离心过程中离心力对离心时间的积分。離心積分考虑了离心过程中各种影响因素对离心加速的影响,保证施加于样品的离心力总量一致,从而保证一致的离心效果。離心積分还表明:短时间的高速离心和长时间的低速离心可以获得相同的离心效果。

● 差速离心(differential centrifugation )

      差速離心法是利用樣品中各種組分的沈降系數不同而進行分離的方法,又稱差分離心或差級離心。通常兩個組分的沈降系數差在10倍以上時可以用此法分離。在差速離心中細胞器沈降的順序依次爲:核、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體、內質網與高基體、zui後爲核蛋白體。沈降系數差別在一個或幾個數量級的顆粒,可以用此法分離

   差速離心首先要選擇好顆粒沈降所需的離心力和離心時間,應用方式與學科:

   1:分步改變離心速度,用不同強度的離心力使具有不同密度的物質分批分離的方法。

應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科);方法與技術(二級學科)

2:利用不同物質沈降速率的差異,在不同離心速度下分離和收集不同顆粒的離心技術。常用于分離細胞勻漿中的各種細胞器。

應用學科:細胞生物學(一級學科);細胞生物學技術(二級學科)

差速離心法的優點是樣品的處理量較大,用于大量樣品的初分離,可使用容量較大的轉子

 

 

 

III  安全离心                                                            

  操作者的安全防護

      样品与转子在高速离心状态下会产生巨大的离心力,因此对使用者的安全保护是離心機设计的首要因素。

●     需用高強度材料

【1】       環氧塗層鋼制材料:抵抗各種溶劑和碎片的侵蝕。

【2】       鋼制結構,不鏽鋼腔:高強度,抗腐蝕

【3】       盔甲電鍍:當轉子或吊桶碎裂是,能夠起到保護腔體作用

●     不平衡保護,不平衡時自動停機,自動失衡識別。

●     转子自动识别【高速離心機】,超速保护。防止使用者误操作导致危险的发生

●     自動平衡,無需配平

●     保證轉子高速運轉時突然發生軸斷裂時:

【1】       轉子不會飛出

【2】       離心力外表看不成變形

【3】       斷電後能正常開蓋

【4】       內腔體變形不超過:3mm

【5】       離心機在试验台上不发生水平位移

●     使用者需与離心機保持至少30cm的安全距离

●     溫度控制,保證生物樣品活性

離心常見的溫度設定爲:4℃,20,  37℃ ,其中以4℃(生物零度)zui爲重要,这就要求離心機具备预制冷功能、定温启动功能,保证样品一放入就处于安全温度下离心。

Ⅳ  舒適離心                                                                 

   低噪音設計:

 通常離心機噪音范围为55—70dBA;

 65dBA爲可接受的噪音水平

<60dBA爲較好的噪音水平

每增加3dBA相當于增加一倍的噪音效果

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